小菜蛾为何能抗Bt农药?相关研究取得新进展
Bt抗性正在成為農業植保的重要問題之一,近日,記者從中國農業科學院獲悉,該院蔬菜花卉研究所張友軍團隊在小菜蛾Bt抗性中腸受體基因轉錄調控機制研究領域取得新進展,研究結果為昆蟲Bt抗性轉錄調控機制研究提供了全新視角。相關研究發表在國際著名期刊《影響因子(PLoS Genetics)》上。
Bt是蘇云金芽胞桿菌的簡稱,屬革蘭氏陽性細菌,它產生的多種殺蟲蛋白可以殺死多種農業害蟲,具有靶標特異、環境友好的特點,基于Bt殺蟲蛋白的生物殺蟲劑及轉基因作物已廣泛應用于全球農業生產。
然而,隨著Bt生物殺蟲劑和轉Bt基因抗蟲作物的大面積使用與推廣,害蟲對Bt快速進化產生抗藥性,嚴重制約了Bt生物技術產品的發展。據介紹,目前,全世界至少已經有9種重大農業害蟲在田間對Bt生物殺蟲劑和轉Bt基因抗蟲作物產生了高抗性。
其中,小菜蛾是為害十字花科蔬菜和作物的重要害蟲,每年在全球造成的經濟損失高達40億-50億美元,并且對多種化學和生物殺蟲劑產生了抗藥性,是最早在田間被報道對Bt生物殺蟲劑產生抗藥性的農業害蟲。
張友軍團隊前期研究已表明,小菜蛾昆蟲激素含量升高及其串擾激活的MAPK信號途徑反式調控中腸受體和非受體同源基因差異表達,從而使小菜蛾在維持正常生長發育的前提下對Bt Cry1Ac殺蟲蛋白產生完美的高抗性。然而,MAPK信號途徑調控中腸基因差異表達的轉錄調控機制仍不清楚。
在前期研究的基礎上,張友軍團隊此次成功解析了小菜蛾Bt Cry1Ac殺蟲蛋白受體基因PxmALP的轉錄調控機制。研究發現,該基因的啟動子序列在Cry1Ac敏感和抗性種群中雖然存在多個SNP位點,但這些位點并不影響PxmALP的啟動子活性。進一步分析表明,PxmALP啟動子區存在多個轉錄因子結合位點,其中轉錄因子GATAd在敏感種群中表達量顯著高于抗性種群,且可差異調控敏感和抗性小菜蛾啟動子活性變化。
隨后,通過定點突變、EMSA及酵母單雜等實驗技術,該研究驗證了GATAd可與敏感和抗性小菜蛾啟動子中不同的結合位點特異性結合。此外,在抗性啟動子中GATAd結合位點附近,連續六個核苷酸的插入顯著抑制了GATAd的調控活性。抗性小菜蛾種群中利用RNAi沉默MAPK信號途徑上游的MAP4K4基因后,GATAd和PxmALP基因的表達量顯著上調,說明MAPK信號途徑通過反式調控GATAd從而調控PxmALP基因的表達,導致小菜蛾對Bt殺蟲蛋白Cry1Ac產生高抗性。
據介紹,該研究為昆蟲Bt抗性相關基因的轉錄調控機制研究提供了重要借鑒,并為揭示害蟲Bt抗性進化機制提供了理論支撐。